Определение РНК вируса Epstein-Barr (EBV; EBER) методом хромогенной гибридизации in situ (SISH, парафиновый блок) в Ташкенте

Показания к назначению анализа:

• диагностика лимфопролиферативных заболеваний (патологий, которые сопровождаются неконтролируемым делением аномальных лимфоцитов);
• выявление инфицирования клеток вирусом Эпштейна — Барр;
• определение прогноза и тактики лечения.

Рак — злокачественное заболевание, при котором клетки начинают неконтролируемо делиться, что приводит к образованию опухоли.

Одной из причин развития рака могут быть генетические мутации, вызванные вирусом Эпштейна — Барр.

Вирус Эпштейна — Барр (или вирус герпеса IV типа) — ДНК-содержащий вирус, с которым «знакомы» около 90% взрослого населения планеты.

Клетками-мишенями для вируса служат B-лимфоциты — клетки, которые играют важную роль в формировании антительного (гуморального) иммунитета. Когда патоген проникает в организм, он воздействует именно на них: РНК вируса Эпштейна — Барр (EBER, the Epstein — Barr virus-encoded small RNAs) встраиваются в геном этих клеток и вызывают хромосомные нарушения.

EBER делают В-лимфоциты устойчивыми к воздействию белков, регулирующих клеточную гибель. Такие лимфоциты становятся «бессмертными» и получают возможность непрерывно делиться.

Если иммунная система находится в норме, она может контролировать поведение поражённых клеток с помощью механизмов защиты от развития опухолей. Однако под влиянием различных факторов устойчивость организма к патологическим процессам снижается, что увеличивает риск развития онкологического заболевания.

Факторы риска развития злокачественных заболеваний:

• возраст (чаще встречается среди пациентов старше 60 лет);
• иммунодефицитные состояния;
• некоторые вирусные инфекции (вирус Эпштейна — Барр, Т-лимфотропный вирус человека I типа, вирус герпеса человека VIII типа, ВИЧ-инфекция);
• генетическая предрасположенность;
• употребление табака.

Каждый год вирус Эпштейна — Барр становится причиной около 200 000 случаев рака в мире.

Вирус Эпштейна — Барр может вызывать:

• опухоли лимфоидного происхождения (лимфома Ходжкина, лимфома Беркитта и др.);
• опухоли нелимфоидного происхождения (карцинома носоглотки, карцинома желудка).

Анализ направлен на выявление РНК, кодируемых вирусом Эпштейна — Барр (EBER). Исследование проводят методом гибридизации in situ с использованием серебра (SISH).

Источники

1. Хланта Д. А., Хланта Н. А., Федоскова Т. Г., Гришина Т. И., Филатова Г. А., Лутковская Ю. Е., Ларина В. Н. Современные представления о вирусе Эпштейна — Барр и его роли в развитии злокачественных процессов РМЖ // Медицинское обозрение, 2020. №3. С. 148–154. doi:10.32364/2587-6821-2020-4-3-148-154
2. Park S., Lee J., et al. The impact of Epstein-Barr virus status on clinical outcome in diffuse large B-cell lymphoma // Blood, 2007. Vol. 110(3). P. 972–978. doi:10.1182/blood-2007-01-067769
3. Gao X., Li J., Wang Y., Liu S., Yue B. Clinical characteristics and prognostic significance of EBER positivity in diffuse large B-cell lymphoma: A meta-analysis // PLoS One, 2018. Vol. 13. Issue 6. doi:10.1371/journal.pone.0199398

Особенности и преимущества методики

SISH (гибридизация in situ с использованием серебра) — метод анализа генетического материала клетки, при котором используются ДНК-зонды — искусственно созданные фрагменты ДНК, содержащие серебряные метки.

ДНК-зонды связываются с комплементарными (взаимно соответствующими) участками ДНК исследуемых клеток. Изучение полученных образцов под флуоресцентным микроскопом позволяет выявлять различные аномалии в структуре генетического материала.

Для исследования используют фрагмент ткани костного мозга, который «впаивают» в парафиновый блок. В таком виде при правильной температуре биоматериал может храниться очень долго. Блоки можно использовать для проведения повторных исследований, что очень важно при подборе тактики лечения. После исследования блок возвращают пациенту.